Estudio epidemiológico de paratuberculosis bovina en hatos lecheros del sur de Nariño, Colombia / Epidemiological Study of Bovine Paratuberculosis in Dairy Herds in Southern Narino, Colombia / Estudo epidemiológico de paratuberculose bovina em gado leiteiro do sul de Nariño, na Colômbia

Introducción: la paratuberculosis (PTBC), también llamada enfermedad de Johne, es un trastorno gastrointestinal crónico de rumiantes domésticos y silvestres causado por Micobacterium avium subespecie paratuberculosis (MAP). Está distribuida mundialmente y genera un alto impacto en la ganadería, debido a que disminuye la producción, se pierde potencial genético por reemplazos tempranos de animales infectados y se incrementa la mortalidad. Objetivos: evaluar la presencia de anticuerpos anti-MAP en fincas lecheras del sur de Nariño y describir su distribución de acuerdo con características poblacionales. Métodos: se realizó un estudio transversal descriptivo en 958 vacas mayores de 2 años en 16 fincas lecheras. Para determinar la presencia de anticuerpos, se usó la prueba diagnóstica de Elisa indirecto (kit comercial Svanova®). La seropositividad fue asociada con las variables de raza, edad, ubicación, condición corporal, número de lactancias y estadio clínico mediante la prueba estadística de chi cuadrado. Resultados: se encontraron 15 fincas (94 %) con al menos un animal positivo y 77 vacas (8 %) con anticuerpos anti-MAP. Se estableció una asociación significativa (p < 0,05) con la condición corporal del animal. Conclusiones: en los principales municipios lecheros se encontraron vacas con anticuerpos anti-MAP y no se encontró relación entre edad, raza, ubicación y estatus clínico con la seroprevalencia-MAP, pero sí con la condición corporal.

Introduction: Paratuberculosis (PTB), or Johne's disease, is a chronic gastrointestinal disorder in domestic and wild ruminants caused by Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP). It is distributed worldwide and generates a high impact on livestock, due to a decrease in production, loss of genetic potential by early replacement of infected animals, and increase in mortality. Objectives: To evaluate the presence of anti-MAP antibodies in dairy farms in southern Narino and to describe their distribution according to population characteristics. Methods: A descriptive cross-sectional study was performed on 958 cows over 2 years of age in 16 dairy farms. To determine the presence of antibodies, the indirect Elisa diagnostic test was used (Svanova® commercial kit). Seropositivity was associated with variables of race, age, location, body condition, lactation number, and clinical state by using the chi-square test statistic. Results: There were found 15 farms (94%) with at least one positive animal and 77 cows (8%) with anti-MAP antibodies. A significant association (p < 0.05) with the animal's body condition was established. Conclusions: Cows with anti-MAP antibodies were found in major dairy municipalities; it was found that MAP-seroprevalence is not connected to age, race, location and clinical status, but it is linked to body condition.

Introdução: a paratuberculose (PTBC), também conhecida como doença de Johne, é um transtorno gastrointestinal crônico de ruminantes domésticos e silvestres causado por Mi-cobacterium avium subespécieparatuberculose (MAP). Está distribuída mundialmente e gera um alto impacto na pecuária, devido a que diminui a produção, se perde potencial genético por substituições precoces de animais infectados e aumenta a mortalidade. Objetivos: avaliar a presença de anticorpos anti-MAP em fazendas de gado do sul de Nariño e descrever sua distribuição de acordo com características populacionais. Métodos: realizou-se um estudo transversal descritivo em 958 vacas maiores de 2 anos em 16 fazendas produtoras de gado. Para determinar a presença de anticorpos, se usou a prova diagnóstica de Elisa indireto (kit comercial Svanova®). A soro positividade foi associada com as variáveis de raça, idade, localização, condição corporal, número de lactancia e estádio clínico através da prova estatística de chi quadrado. Resultados: se encontraram 15 fazendas (94 %) com pelo menos um animal positivo e 77 vacas (8 %) com anticorpos anti-MAP. Estabeleceu-se uma associação significativa (p < 0,05) com a condição corporal do animal. Conclusões: nos principais municípios produtores de leite se encontraram vacas com anticorpos anti-MAP e não se encontrou relação entre idade, raça, localização e status clínico com a soro prevalência-MAP, mas sim com a condição corporal.

Desarrollo de una prueba de ELISA para detectar anticuerpos en carneros vacunados o infectados con Corynebacterium pseudotuberculosis / Development of an ELISA test to detect antibodies in vaccinated sheep or infected Corynebacterium pseudotuberculosis

El objetivo de este trabajo fue evaluar un ELISA indirecto desarrollado para medir la respuesta inmune humoral en carneros vacunados contra la linfoadenitis caseosa (LC) y/o desafiados con una cepa de Corynebacterium pseudotuberculosis homóloga. Se distribuyeron corderos de 4 meses clínicamente sanos en 4 grupos: grupo 1, corderos vacunados (G1, n = 5); grupo 2, corderos vacunados e inoculados (G2, n = 8); grupo 3, corderos inoculados (G3, n = 2); y grupo 4, control (G4, n = 2). Los animales del G1 y del G2 recibieron dos dosis de una bacterina experimental; los del G2 y del G3 fueron desafiados con una cepa de C. pseudotuberculosis cuatro semanas posvacunación. Se estudiaron por ELISA los títulos serológicos durante 7 meses y se efectuaron las necropsias en los grupos G2, G3 y G4. Se tomaron muestras de pulmón y linfonódulos para efectuar estudios bacteriológicos e histopatológicos. La cepa inoculada en los animales del G2 y del G3 reprodujo las lesiones macroscópicas y microscópicas típicas de la LC; ésta fue aislada del sitio de inoculación, de linfonódulos o de pulmón en 7/8 animales del G2 y en 2/2 animales del G3. La prueba de ELISA, con una sensibilidad del 98% y una especificidad del 100%, detectó diferencias significativas entre los serorreactores de los diferentes grupos experimentales y permitió establecer una relación con el tipo de tratamiento aplicado. Se concluye que el ELISA desarrollado puede ser una herramienta útil para identificar animales infectados y con clínica positiva a la LC.

The aim of this study was to evaluate an indirect specific ELISA developed for the detection of humoral immune response in vaccinated sheep and/or challenged with a Corynebacterium pseudotuberculosis strain. Healthy 4 month-old lambs were distributed into 4 groups: Group 1 immunized (G1, n = 5), Group 2 vaccinated/inoculated (G2, n = 8), Group 3 inoculated (G3, n = 2) and Group 4 control (G4, n = 2). Groups G1 and G2 received two doses of an experimental bacterin. Four weeks postvaccination, G2 and G3 groups were challenged with a C. pseudotuberculosis strain. Serological titers were studied by ELISA for 7 months and pathological studies were performed in groups G2, G3 and G4 by taking lung and lymph node samples for bacteriology and histopathology. The inoculated strain in G2 and G3 animals reproduced the macroscopic and microscopic lesions typical of caseous lymphadenitis (CL) and was isolated from the inoculation site, lymph nodes and/or lung in 7/8 animals from G2, and 2/2 animals of G3. The developed ELISA test had sensitivity and specificity of 98% and 100% respectively, detected significant differences between serological reactors of different experimental groups and allowed to establish a relationship with the type of treatment. We conclude that the developed ELISA may be a useful tool to identify infected animals with positive clinical CL.

Implementación de la prueba del anillo en leche y elisa indirecto para el diagnóstico de brucelosis en rebaños doble propósito del estado Lara, Venezuela / The ring test and indirect elisa for brucella detection in milk on dual purpose bovine herds in the state of Lara, Venezuela

El control eficiente de la brucelosis bovina requiere la detección oportuna de la enfermedad en los rebaños. Tradicionalmente, la Prueba del Anillo de Leche (PAL) o Ring Test se ha utilizado para realizar vigilancia epidemiológica de brucelosis a nivel de rebaños lecheros, no obstante, esta técnica presenta resultados variables dependiendo del número de animales que aportan leche a la muestra y presencia de leche de vacas con mastitis o de calostro en la muestra. Además, la PAL es una prueba subjetiva producto de la apreciación visual del analista. Como método alternativo se han desarrollado diversos estuches de ELISA indirecto (ELISAi) que permiten el diagnóstico de la brucelosis en muestras de leche. Los formatos de ELISAi muestran una gran sensibilidad y sus resultados son medidos por un espectofotómetro, lo que disminuye el error de apreciación humano. En Venezuela, la mayor parte de la producción de leche se obtiene a partir de animales mestizos de doble propósito, generalmente criados bajo condiciones sanitarias deficientes y con gran variación en el número de animales que componen los rebaños, aunado a importantes tasas de mastitis y un escaso control del periodo de retiro del calostro. Se realizó un estudio para conocer el status de la brucelosis en el estado Lara, Venezuela, tomando 510 muestras de leche en 258 Unidades de Producción, para realizar PAL y ELISAi, encontrándose que el 27,25% eran No Negativas a la PAL y el 13,14% eran positivas a ELISAi. Ambas pruebas indican la presencia de la enfermedad en los predios analizados. Se observó una sensibilidad relativa de la prueba de la PAL al compararla con ELISAi del 56,72%, mientras que la especificidad relativa alcanzó el 77,20%. La baja sensibilidad de PAL permite que ocurra un alto número de muestras falsas negativas, lo que conlleva a fallas del sistema de vigilancia epidemiológica.

The efficient control of the Bovine Brucellosis needs the opportune detection of the disease in the herds. Traditionally the Ring Test has served to realize epidemiological alertness of Brucellosis to level of dairy herds, nevertheless, this technology presents changeable behaviors depending on the number of animals that contribute milk sample and presence of milk of cows with mastitis or colostrum in the sample. In addition, the Ring Test is a subjective test, product of the visual appraisal of the analyst. As alternative method there have developed diverse kits of indirect ELISA (ELISAi) that allow the diagnosis of the Brucellosis in samples of milk. ELISAi’s formats show a great sensibility and results are measured by a spectrophotometer, which diminishes the human mistake of appraisal. In Venezuela most of the milk production is obtained from half-caste animals of dual purpose, generally raised under sanitary deficient conditions and by great variation in the number of animals that compose the herds, united to important rates of mastitis and a scanty control the period of withdrawal of the colostrum. A study was realized to know the status of the Brucellosis in the Edo. Lara - Venezuela, taking 510 samples of milk in 258 Units of Production, to fulfil Ring test and ELISAi, thinking that 27.25% was Not Negative to the Ring Test and 13.14 were positive to ELISAi. Both tests indicate that in the analyzed herds of the Lara State the disease exists. It was observed a relative sensibility of the Ring Test on having compared it with ELISAi of 56.72%, whereas the relative specificity reached 77.20%. This low sensibility carries in a high number of false negative samples, which is translated in faults of the epidemiological system of alertness.